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微孔板材料的固有污染如何控制？
北京亙辰科技有限公司 Frank Han
（本文系*原創，請勿侵權。如需轉載請敬請征得作者同意：北京亙辰科技有限公司）
文章介紹
在先前的獨立評估報告（“Extractables Testing in Deep Well Plates”, 2005）中，已表明，市面上銷售的許多品牌的微孔板使用低級聚丙烯聚合物，內含顯著水平的浸出物污染。（即具有嚴重污染）
肯特大學化學系代表Porvair Sciences R＆D對市面上的商業化微孔板做進一步和更詳細的的研究。在許多商業化微孔板的樣品中再次發現有顯著性水平的浸出物污染。這項新實驗不僅測試了“天然”聚丙烯微孔板，而且測試了更廣泛的彩色和黑色的微孔板。
該研究于2013年初進行，提供了來自歐洲，美國和中國的眾多制造商的大量微孔板的實驗數據。質譜數據顯示：在測試的微孔板中發現了來自原材料的浸出物污染非常顯著。
研究背景
在本文中確定浸出物污染比較復雜，長鏈烴污染物在任何光譜中定會引發外源熒光信號，甚至在大規模篩選中會引起全細胞凋亡或停滯的假陽性。在法醫學中，這些浸出物污染很容易掩蔽濫用的藥物或其代謝物并引起離子抑制，導致定量不準確。
研究方法
從各品牌制造商處獲得用于測試的微孔板樣品。選擇新的未使用的板，用干凈，干燥的壓縮空氣流去除可能積聚的任何顆粒物。通過在每個樣品板的三個孔中孵育適當體積的HPLC級甲醇過夜來進行聚合物浸出和可提取污染物的測試。甲醇中加入10ug / ml的Caffeine 作為內標。將板用封膜機密封并靜置過夜。過夜孵育后，250℃下對每個孔樣品的1ul等分試樣，并在GC-MS系統上使用不分流進樣進行分析。
實驗結果
綠色表示無污染。 黃色表示輕微的污染，只有一種污染物，且不一定在三個測試孔中都出現。紅色表示污染非常嚴重。
Description | I.D. | Results |
Porvair 2ml square well plate | D | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well plate | E | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well black plate | F | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well red plate | G | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well blue | H | Extractibles Free |
European 1.6ml low profile storage plate | A | Minor Contaminant |
USA 10ml starge plate | B | Minor Contaminant |
USA 2ml deep well plate | J | Minor Contaminant |
USA 1ml round well plate | N | Minor Contaminant |
USA 48 well deep well plate | C | Significant Contaminant |
China sourced 2ml deep well plate | I | Significant Contaminant |
European microcentrifuge tubes, black | L | Significant Contaminant |
European 1ml round deep well plate | M | Significant Contaminant |
USA 2ml square well deep well plate | Q | Significant Contaminant |
European 2ml square well, round bottomed plate | S | Significant Contaminant |
本研究中使用的板/管來自美國和歐洲、中國的不同來源的制造商。
污染物識別
將提取的污染物與NIST數據庫進行比較以鑒定所涉及的化學品。這些化學品顯示為注塑過程中的塑料增強劑和模具流動劑的組合。
污染物 | 商業用途 |
丙烯酰胺 | 防結塊劑、潤滑劑 |
十二烷酸 | 脫模劑 |
十六烷酸、甲酯 | 軟化劑、加速劑 |
十八烷酸、甲酯 | 塑料潤滑劑 |
9-十八碳烯酸、油酸 | 塑料潤滑劑、脫模劑 |
實驗結論
本實驗中發現來自不同品牌的微孔板顯示浸出物污染嚴重。某些制造商在生產微孔板時使用低等級聚丙烯，含有流動改性添加劑或“脫模劑”用于簡化生產及模制過程。
結果表明，高質量醫療級聚丙烯雖然容易獲得，但是超過一半的測試板表現出不同程度的浸出物污染，與2005年的獨立實驗室測試一樣，所有Porvair科學公司的深孔板均顯示無污染。
建議
建議定期評估用于在有機溶劑中長期儲存樣品的微孔板，以檢查是否有浸出物污染。在進一步分析儲存化合物或樣品之前，應從制造商處獲得微孔板的純度證書。在不清楚是否有污染的情況下，應進行浸出物污染測試，以防止有價值的化合物或樣品面臨被污染的風險。
關于Porvair科學
Porvair科學，微孔板產品的制造專家，服務生命科學，生物技術，醫藥研發和分子生物學的微孔板解決方案的所有應用。也為各*生物公司設計zui通用的過濾板，包括Waters，Millipore，Qiagen，Whatman，GE Healthcare，Varian，Biotage、當然還有Porvair。
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